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COR-L23細(xì)胞,COR-L24細(xì)胞株的培養(yǎng)和傳代

2017-02-23 瀏覽次數(shù):1458

COR-L23細(xì)胞,COR-L24細(xì)胞株的培養(yǎng)和傳代

產(chǎn)品名稱:COR-L23細(xì)胞

中文名稱:

貨號(hào):COR-L23

規(guī)格:1~3*106細(xì)胞/25cm2培養(yǎng)瓶

上海蒂科生物 細(xì)胞株、血清、培養(yǎng)基、 各種細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)試劑,開學(xué)酬賓*中,更多產(chǎn)品,更大優(yōu)惠,敬請(qǐng)!!

 

用于檢測細(xì)胞因子的細(xì)胞株通常培養(yǎng)于含10%小牛血清和抗生素的培養(yǎng)液中,培養(yǎng)細(xì)胞因子依賴細(xì)胞株還有加入適量細(xì)胞因子。在37℃ 5% CO2的飽和水汽二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng),3~4天傳代一次。

懸浮生長細(xì)胞的傳代:

直接直接吸去或離心后吸去培養(yǎng)上清液,用新鮮培養(yǎng)液懸浮細(xì)胞,1:3或1:5稀釋細(xì)胞后,分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。

帖壁生長細(xì)胞的傳代:

吸去培養(yǎng)液,用PBS洗滌細(xì)胞一次,加入消化液,在37℃中消化約3~10分鐘,待細(xì)胞開始脫落時(shí),倒去消化液,加入新鮮培養(yǎng)液,懸浮和吹打分散細(xì)胞。也可以待細(xì)胞*消化脫落,500×g離心5分鐘,去除消化液,用新鮮培養(yǎng)液懸浮細(xì)胞。1:3或1:5稀釋細(xì)胞后,分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。

2、細(xì)胞株的凍存:

(1)取培養(yǎng)2~3天生長旺盛的細(xì)胞,用細(xì)胞培養(yǎng)液將細(xì)胞配成2×106~2×107/ml。

(2)在1ml細(xì)胞凍存管中加入0.5ml細(xì)胞懸液,0.4ml小牛血清和0.1ml二甲基亞砜(或甘油),混勻后密封。置4℃ 1小時(shí),-20℃ 2小時(shí),然后直接放入液氮中或置液氮蒸汽上隔日后浸入液氮中。

3、細(xì)胞株的復(fù)蘇:

復(fù)蘇時(shí),從液氮中取出凍存管,立即置37℃水浴中融化細(xì)胞。將細(xì)胞直接加入10ml含15%小牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)液中,置37℃ 5%CO2飽和水汽二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞待細(xì)胞全部沉降后小心吸去上清液,更換新鮮的上述培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng);帖壁細(xì)胞則培養(yǎng)2~3實(shí)驗(yàn)。

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