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技術(shù)文章 / article
胎牛血清質(zhì)檢標(biāo)準(zhǔn)解讀
2023-10-27 瀏覽次數(shù):1119
【胎牛血清】
胎牛血清(fetal bovine serum,F(xiàn)BS)指通過對(duì)未出生的胎牛行穿刺采血,再經(jīng)自然層析、離心、過濾等處理而得到的上清液。在細(xì)胞培養(yǎng)體系中,血清是不屬于人工合成的成分,同時(shí)也讓血清成分成為細(xì)胞培養(yǎng)體系中最大的不確定因素,因此,如何保障胎牛血清的質(zhì)量是細(xì)胞培養(yǎng)得好壞的決定性因素之一。
【胎牛血清的檢測(cè)指標(biāo)】
胎牛血清的COA中,常規(guī)的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)包括內(nèi)毒素、總蛋白、支原體、細(xì)菌、病毒、滲透壓、總蛋白等。胎牛血清產(chǎn)品分析證書(COA)就是FBS質(zhì)控的重要體現(xiàn)。
【理化檢測(cè)】
外觀
胎牛血清外觀顏色根據(jù)血紅蛋白含量的不同,呈現(xiàn)出的淺棕色或琥珀色,優(yōu)質(zhì)的胎牛血清應(yīng)該是淺黃色澄清、無(wú)溶血、無(wú)異物稍粘稠液體。但不同批次間的同一款血清,顏色上也可能存在一定差異。
PH
《中國(guó)藥典2020版》中對(duì)新生牛血清的標(biāo)準(zhǔn) pH 值應(yīng)為7.00~8.50。藥典中未明確對(duì)胎牛血清做出pH 值要求,行業(yè)內(nèi)均以此為參考。一般采用電位法進(jìn)行測(cè)定。
滲透壓
滲透壓的檢測(cè)一般采用冰點(diǎn)下降法,滲透壓是為了維持細(xì)胞張力,調(diào)節(jié)細(xì)胞的代謝。滲透壓摩爾濃度(mOsmol/kg):250-330之間。
總蛋白
測(cè)量血清中蛋白質(zhì)總含量可確認(rèn)動(dòng)物的年齡及符合產(chǎn)品的規(guī)格,采用的雙縮脲法進(jìn)行檢測(cè),該方法實(shí)驗(yàn)反應(yīng)產(chǎn)生的紫色絡(luò)合物顏色的深淺與蛋白質(zhì)濃度成正比,故可用來(lái)測(cè)定蛋白質(zhì)含量。
血紅蛋白
紅蛋白含量決定血清色澤的因素是血紅蛋白和膽紅素,前者含量高,則呈現(xiàn)偏紅的顏色,后者高則呈現(xiàn)為金黃色。
細(xì)菌內(nèi)毒素
內(nèi)毒素會(huì)因?yàn)閱?dòng)補(bǔ)體活性而產(chǎn)生細(xì)胞毒性,內(nèi)毒素控制在10EU/ml以內(nèi)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn),過高的內(nèi)毒素將會(huì)對(duì)部分細(xì)胞產(chǎn)生刺激作用,影響細(xì)胞生長(zhǎng)。