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RAW264.7細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)分享★CQ★

2018-05-07 瀏覽次數(shù):3162

RAW264.7細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)分享★CQ★

★CQ★上海蒂科生物專(zhuān)注生物科研試劑:胎牛血清(HAKATA、Hylone、SERANA、NTC、Corning、BOVOGEN、PAA、SIGMA等),無(wú)外泌體血清(SBI),ELISA試劑盒(HAKATA自主品牌、進(jìn)口),2萬(wàn)多株細(xì)胞(含400多種類(lèi)通過(guò)STR鑒定),培養(yǎng)基(干粉、液體),雙抗,胰酶,sigma試劑等,本公司供應(yīng)原裝胎牛血清,*的服務(wù)、真誠(chéng)的態(tài)度、堅(jiān)持以質(zhì)取勝,做您的實(shí)驗(yàn)專(zhuān)家。;。

★CQ★raw264.7細(xì)胞是一種鼠源的巨噬細(xì)胞系,raw264.7細(xì)胞貼壁快,形態(tài)以類(lèi)圓形和不規(guī)則為主,一般1~2個(gè)核,極少數(shù)有3個(gè)核,胞漿伸展時(shí)胞體較大。細(xì)胞貼壁緊,難以消化,需要多次吹打消化,采用細(xì)胞刮法。  

★CQ★raw264.7細(xì)胞復(fù)蘇:

將液氮中細(xì)胞直接放入37℃左右水浴中快速解凍,后加入5倍體積培養(yǎng)基,800rpm離心3min,轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。成功率基本上99.9%

★CQ★raw264.7細(xì)胞培養(yǎng):

1)培養(yǎng)條件:1640+10%FBS、5%CO2、37°C;

2)這細(xì)胞對(duì)刺激很敏感,不用胰酶消化,盡量不用雙抗;傳代的時(shí)候盡量吹散,防止扎堆,也不能吹太過(guò),吹太過(guò),細(xì)胞會(huì)受到刺激易張觸角;

3)raw264.7細(xì)胞對(duì)PH也比較敏感,偏堿性的時(shí)候容易扎堆,培養(yǎng)基用久了偏堿性的時(shí)候要注意調(diào)一下;

4)細(xì)胞生長(zhǎng)較快,建議一天傳一次代。

★CQ★raw264.7細(xì)胞凍存:

凍存液為50%血清,10%DMSO,40%培養(yǎng)基,放入凍存盒后4℃、30min,直接轉(zhuǎn)入-80℃,過(guò)夜后轉(zhuǎn)入液氮。

 

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